在保證一定分離效果的前提下,快速分析是色譜技術(shù)的重要發(fā)展方向。
色譜柱管的設(shè)計和使用條件優(yōu)化可以縮短分析時間,提高分析效率,例如采用更小粒度的填料、優(yōu)化流動相流速等。
色譜柱管的使用與維護(hù):
1.安裝與連接:安裝時需確保柱管與接頭的密封良好,避免泄漏。連接方式應(yīng)正確無誤,以保證流動相能夠順利通過色譜柱,同時減少柱外死體積,防止對分離效果產(chǎn)生不良影響。
2.流動相選擇:根據(jù)樣品性質(zhì)和色譜柱類型選擇合適的流動相,流動相的組成、pH值等因素都會影響分離效果和色譜柱的使用壽命。例如,在使用反相色譜柱時,通常采用甲醇、乙腈等有機溶劑與水組成的混合流動相。
3.樣品前處理:樣品中的雜質(zhì)可能會污染色譜柱,降低柱效和使用壽命,因此在進(jìn)樣前需對樣品進(jìn)行適當(dāng)?shù)念A(yù)處理,如過濾、萃取、濃縮等,以去除懸浮物、大分子雜質(zhì)等。
4.日常維護(hù):使用完畢后,應(yīng)及時清洗色譜柱,防止殘留樣品在柱內(nèi)積累。長期不用時,需按照色譜柱的保存要求進(jìn)行妥善保存,如用適當(dāng)?shù)娜軇_洗后密封保存,避免柱內(nèi)干燥或受潮。
色譜柱管的測定步驟:
1.安裝前檢查:檢查氣體過濾器、載氣、進(jìn)樣墊和襯管等,保證輔助氣和檢測器的通氣暢通。若之前做過較臟樣品或活性較高的化合物,需將進(jìn)樣口的襯管清洗或更換。
2.安裝色譜柱:將螺母和密封墊裝在色譜柱上,并小心地將色譜柱兩端切平,確保切面平滑整齊。然后將色譜柱連接于進(jìn)樣口上,注意插入深度要合適,通常入口應(yīng)保持在進(jìn)樣口的中下部,即處于進(jìn)樣針穿過隔墊插入進(jìn)樣口后針尖與色譜柱入口相距1~2cm,具體可參考GC儀器的隨機手冊。避免用力彎曲擠壓毛細(xì)管柱,防止其斷裂受損。
3.設(shè)置條件:根據(jù)分析需求,設(shè)置色譜儀的相關(guān)參數(shù),如溫度、壓力、流速等。一般先設(shè)置較低的流速,以保護(hù)色譜柱,并逐漸調(diào)整至合適的流速。
4.進(jìn)行測試:注入樣品,啟動色譜儀,使樣品在色譜柱中進(jìn)行分離。觀察色譜峰的形態(tài)、保留時間、峰寬等參數(shù),以評估色譜柱的性能。
5.數(shù)據(jù)處理與分析:記錄色譜峰的相關(guān)數(shù)據(jù),如峰面積、峰高、保留時間等,并根據(jù)這些數(shù)據(jù)計算色譜柱的柱效、選擇性、分離度等指標(biāo),從而評價色譜柱的性能。